【中華百科全書●科學●濾紙色層分析法】 濾紙色層分析法,屬於色層分析之一種。
層析現象在濾紙上進行時,稱為濾紙色層分析。
濾紙纖維具有吸濕性,由空氣中所吸收之水分,則為層析之靜止相,展開時所用之溶劑,則屬移動相。
混合試樣在兩相間,依分配係數之大小被帶動,因此稱為液體-液體分配層析。
此法由馬丁及辛治兩學者奠定在學術上之應用,曾於西元一九五二年獲得諾貝爾獎金。
優點為簡便,曾盛行一時,常用於混合物之分離及定性分析之用。
典型之分析法如下:將混合試樣溶於適當溶劑中,成為液狀,以毛細管取少量試液點在濾紙下端約二公分高之線上。
以吹風機烘乾後,將濾紙下端約○.三至○.五公分浸入展開槽內之溶劑中。
因濾紙之纖維具有毛細管作用,所以不同物質在不同之分配係數下,以不同速度被展開溶劑向上帶動。
據此原理,混合物可藉各種物質之分配係數,而被分離。
當展開時溶劑之移動方向,由下向上展開時,稱為上升法;
倘溶劑置於上方,沿濾紙面由上向下展開時,則稱為下降法。
試樣中倘有多種物質共存,或物質間之理化性質相似,而展開後發現分離效果不彰時,可進行下列步驟:先烘乾展開溶劑,將濾紙轉九十度角,再用另一種不同配方之溶劑展開,則可得良好之分離結果。
如蛋白質水解物等多種物質共存時,常用此法。
只展開一次時,稱為一次展開法,去除溶劑後再用另一配方之溶劑展開時,則稱為二次展開法。
如圖1所示:一為上升法,一為下降法;
圖2則表示二次展開法之實例。
見圖1見圖2展開並烘乾後,濾紙上之試樣本身有顏色者,可直接計算其Rf;
無顏色者,以適當之呈色劑呈色,或照紫外線檢查有無螢光反應,以便確定各物質之正確位置。
Rf可依下式計算:Rf=試樣自原點移動之距離/展開溶劑自原點移動之距離此數字係各物質在固定展開條件下之特有數值,未知物與標準物同時在同一張濾紙上展開時,可藉Rf值、呈色狀態,及斑點形狀等,加以比對。
(施多喜)
引用:http://ap6.pccu.edu.tw/Encyclopedia/data.asp?id=9951 |