本帖最後由 楊籍富 於 2013-1-9 07:22 編輯
【醫學百科●cDNA】
英文參考
complementary
DNAcDNA為具有與某RNA鏈呈互補的堿基序列的單鏈DNA即complementaryDNA之縮寫,或此DNA鏈與具有與之互補的堿基序列的DNA鏈所形成的DNA雙鏈。
與RNA鏈互補的單鏈DNA,以其RNA為模板,在適當引物的存在下,由依賴RNA的DNA聚合酶(反轉錄酶)的作用而合成,并且在合成單鏈cDNA后,在用堿處理除去與其對應的RNA以后,以單鏈cDNA為模板,由依賴DNA的DNA聚合酶或依賴RNA的DNA聚合酶的作用合成雙鏈cDNA。
真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遺傳工程方面廣為應用。
在這種情況下,mRNA的cDNA,與原來基因的DNA(基因組DNA,genomicDNA)不同而無內含子;
相反地對應于在原來基因中沒有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,與exon序列、先導序列以及后續序列等一起反映出mRNA結構。
cDNA同樣可以被克隆。
cDNA文庫的構建分為六個階段:階段1:反轉錄酶催化合成cDNA第一鏈階段2:cDNA第二鏈的合成階段3:cDNA的甲基化階段4:接頭或銜接子的連接階段5:SepharoseCL-4B凝膠過濾法分離cDNA階段6:cDNA與λ噬菌體臂的連接
mRNA反轉錄成cDNA與RNA鏈互補的單鏈DNA,以其RNA為模板,在適當引物的存在下,由依賴RNA的DNA聚合酶(反轉錄酶)的作用而合成(即反轉錄過程中的產物),并且在合成單鏈cDNA后,在用堿處理除去與其對應的RNA以后,以單鏈cDNA為模板,由依賴DNA的DNA聚合酶或依賴RNA的DNA聚合酶的作用合成雙鏈cDNA。
真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遺傳工程方面廣為應用。
在這種情況下,mRNA的cDNA,與原來基因的DNA(基因組DNA,genomicDNA)不同而無內含子;
相反地對應于在原來基因中沒有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,與exon序列、先導序列以及后續序列等一起反映出mRNA結構。
引用:http://big5.wiki8.com/cDNA_48506/ |