【中華百科全書●藥學●抗生素效價測定法】
<P align=center><STRONG><FONT size=5>【<FONT color=red>中華百科全書●藥學●抗生素效價測定法</FONT>】</FONT></STRONG></P> <P><STRONG>抗生素效價測定法，係應用某種抗生素敏感微生物，於一定狀況下加入某種抗生素之稀釋溶液培養之，以測得該抗生素之抑菌效力而確定其效價。</STRONG></P><P><STRONG></STRONG> </P>
<P><STRONG>本法用於抗生素之測定時，其結果較使用化學方法（對照參考方法）所得者為確實。</STRONG></P>
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<P><STRONG>本測定法提供十二種培養基，以適合不同菌種之生長。</STRONG></P>
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<P><STRONG>五種不同pH值之磷酸鉀鹽緩衝液，用於稀釋標準品及檢品、接種液之配製、規定試驗菌種之種類及培養、移植之各種條件及時間。</STRONG></P>
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<P><STRONG>藥典中規定之菌種有八項：一、金黃色葡萄球菌或白色表皮葡萄球菌（StaphylococcusAureusorS.Epidermidis）接種液，二、枯草桿菌或蕈狀蠟桿菌（BacillusSubtilisorB.Cereusvar.Mycoides）接種液，三、卵黃色八疊菌（SarcinaLutea）接種液，四、酵母（SaccharomycesCerevisiae）接種液，五、肺炎桿菌（KlebsiellaPneumoniae）接種液，六、支氣管敗血球桿茵（BordetellaBronchiseptica）接種液，七、大腸桿菌（EscherichiaColi）接種液，八、小芽胞菌（MicrosporumGypseum）接種液。</STRONG></P>
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<P><STRONG>本測定法可分為圓筒平碟法與混濁度，分別說明如左：一、圓筒平碟法：（一）圓筒與培養皿：本法所用之圓筒係不銹鋼或瓷質製成，其外經應為7.9～8.1mm，內經應為5.9～6.1mm，長為9.9～l0.1mm。</STRONG></P>
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<P><STRONG>所用之玻璃培養皿，其大小約為20×100mm。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（二）培養基。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（三）接種液：悉依藥典各論之規定。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（四）平碟之製備：將各論中規定之基層培養基分別置於各培養皿中，每皿21ml﹒並使其均勻分布、加蓋，放置使培養基凝固。</STRONG></P>
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<P><STRONG>各皿分別以接種液中4.0ml﹒接種之，旋轉培養皿使接種液均勻分布於培養基之表面。</STRONG></P>
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<P><STRONG>將圓筒六個自離培養基表面高約12mm處放下，使每一圓筒於直徑約5.6cm之圓周上作等距離排列。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（五）標準品溶液。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（六）檢品溶液：悉依藥典各論之規定。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（七）標準曲線：於測定當日，按照各論之規定，將標準品溶液稀釋，使成一系列之濃度。</STRONG></P>
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<P><STRONG>每一濃度溶液取三只平碟為一組，每只平碟六個圓筒之相間三個圓筒內注滿中間稀釋液（一系列濃度居中者），其餘三個圓筒內注滿該濃度標準品稀釋液。</STRONG></P>
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<P><STRONG>將各平碟於適當溫度（見藥典附錄），經培養十六至十八小時後，測量各平碟中抗生直徑（細菌被藥物抑制生長之澄明圈）。</STRONG></P>
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<P><STRONG>計算各組平碟中中間稀釋液之抗生直徑平均值，並求得三十六個中間稀釋液之總平均值，並由此二平均值求得繪製標準曲線之校正值。</STRONG></P>
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<P><STRONG>例如：硫酸鏈絲菌素效價測定中，三十六個中間稀釋液抗生直徑之總平均值為16.5mm，每毫升含硫酸鏈絲菌素0.80μg，一組中九個中間稀釋液抗生直徑之平均值為16.3mm，則校正為0.2，該組中其餘九個濃度溶液抗生直徑之平均值為15.9mm，則校正後之值應為16.1mm。</STRONG></P>
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<P><STRONG>依同法求得各濃度校正後之抗生直徑平均值。</STRONG></P>
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<P><STRONG>以抗生直徑為橫坐標，各濃度為縱坐標，將標準品各種稀釋液及中間稀釋液於二週期半對數坐標紙上繪製標準曲線。</STRONG></P>
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<P><STRONG>或利用下式求出H及L兩點，連接兩點而得標準曲線。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（方程式1）。</STRONG></P>
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<P><STRONG>上式L：標準曲線最低濃度抗生直徑平均值。</STRONG></P>
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<P><STRONG>H：標準曲線最高濃度抗生直徑平均值。</STRONG></P>
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<P><STRONG>a、b、c、d、e：標準曲線中各種稀釋液抗生直徑平均值。</STRONG></P>
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<P><STRONG>測定法：取三只平碟並於每只平碟六個圓筒之相間三個圓筒內注滿中間稀釋液，其餘三個圓筒內注滿檢品溶液，將各平碟於適當溫度培養十六至十八小時後，測最各抗生直徑。</STRONG></P>
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<P><STRONG>效價計算：由加有檢品之一組平碟，求得其中間稀釋液之抗生直徑平均值，並自中間稀釋液抗生直徑總平均值減去，即得該組之校正值，再求該組檢品溶液之抗生直徑平均值，並與該組校正值相加得其代數和，即為檢品溶液之校正抗生直徑平均值。</STRONG></P>
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<P><STRONG>根據此值自標準曲線上求得檢品之效價。</STRONG></P>
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<P><STRONG>二、混濁度法：接種液、標準品溶液、檢品溶液，悉依藥典各論之規定。</STRONG></P>
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<P><STRONG>測定法：取16×25mm之試管十八支，分成六組（每組三支），於其五組之試管內加入標準品稀釋液一毫升，其他一組中加入檢品溶液一毫升。</STRONG></P>
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<P><STRONG>並於每支試管內加入接種液九毫升，立即將此等試管置於37±0.5°之水鍋中，培養三至四小時，培養後，於每支試管內各加甲醛溶液（1：3）○．五毫升。</STRONG></P>
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<P><STRONG>以未加接種液之培養基XI為空白試驗，以適當之分光光度計，於波長530nm處分別測其吸光度。</STRONG></P>
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<P><STRONG>效價計算：求每組試管標準品稀釋液吸光度之平均值，以此數值為橫坐標，以濃度為縱坐標，於一週期坐標紙上，繪製標準曲線。</STRONG></P>
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<P><STRONG>或由下式求出H及L兩點，並連接兩點而得一標準曲線。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（方程式2）。</STRONG></P>
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<P><STRONG>上式中L及H分別表示最低及最高濃度之吸光度平均值。</STRONG></P>
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<P><STRONG>a、b、c、d、e表示各種稀釋液吸光度之平均值。</STRONG></P>
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<P><STRONG>由檢品溶液吸光度之平均值，於標準曲線上求得檢品之效價。</STRONG></P>
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<P><STRONG>（郭盛助、黃順爵）</STRONG></P>
<P><STRONG></STRONG> </P>引用：http://ap6.pccu.edu.tw/Encyclopedia/data.asp?id=10309
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